ROS试剂盒测定ROS的单位是什么

更新时间2019-07-26 15:43:49

流式结果没有单位，有两种最基本的结果表示方法：

1、阳性细胞百分比，一般用于阴阳性区分较为明显的情况。

2、平均荧光强度，这是一个相对的值，只能用于相同实验条件，相同流式检测条件下比较，一般用于表达强弱的比较。一般，流式上样每管样品细胞10^6就够了。

ROS测定方法

1. 取对数生长期的细胞,以4×105/ ml 密度接种于6 孔细胞培养板上； 

2. 培养过夜后，用于相应实验处理； 

3. 收集处理后的细胞培养液至流式专用管； 

4. 加1ml PBS缓冲液清洗一次，清洗液加入管中； 

5. 胰酶消化收集细胞于上述管中；  

6. 1ml PBS缓冲液清洗剩余细胞一次，清洗液加入离心管； 注：3－6步都收集于同一流式专用管。 

7. 800 g离心6 min，去上清；  

8. 加1 ml PBS缓冲液重悬细胞，再次离心弃上清； 

9. 重悬细胞于1ml 的PBS 缓冲液中；  

10. 加荧光探针如CM-H2 DCFDA（主要检测H2O2 ，1 min,37℃孵育30 min；  

11. 在流式细胞仪上以FS 和SS（侧向散射，指示细胞光透射程度）为参数，选取活细胞（大FS 值，较小sS 值），将其限定在Gate内，对Gate内的细胞进行ROS的分析。以相应荧光探针荧光读数的对数为横坐标，细胞数为纵坐标即可测定活细胞的ROS的相对强度。