如何证明有黑胶虫不是血清的问题

更新时间2019-03-30 06:56:53

有几个是目前大家公认的：

① 与细胞竞争性生长，对细胞生长有不利影响。

② “黑胶虫”会增殖，增殖多时，视野下一大片都为“黑胶虫”。

③ “黑胶虫”与血清有关，与血清质量有很大关系。

2、目前对“黑胶虫”的定论：有2种解释：

第一，黑胶虫为生物。

它是小于细菌的生物，直径小于0.1μm，大多国外血清中多见，可能是国外牛血清中含有的某种原虫。只要它是生物，那么在培养基中一定会对细胞有影响。

黑胶虫不是生物。

国内的血清中，通常灭活之后都会有絮状沉淀出现，而黑胶虫出现时，所使用的血清被反复冻融过多次。所以推测，所谓的“黑胶虫”其实就是血清中的某些蛋白成分的物质，经过灭活之后丧失活性，在培养基中，镜检见到的运动其实是这些物质在溶液中做“布朗运动”。随着细胞消耗培养基，这些物质越来越多，最后细胞所用的营养消耗完，细胞容易死亡。

处理方法

首先

血清买回来灭活前冻融应逐级冻融，即按照-20℃——4℃完全融化后，再置入水浴中，与室温一起升高到37度，这样的目的是避免温度骤变，导致血清中的营养物质丧失活性。

第二

血清灭活后分装保存。按照每次用血清的量分装，尽量减少血清冻融的次数。分装时注意无菌。

第三

细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%，但如果血清冻融次数过多，那营养物质丧失活性，按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分，故培养基配置时一般用18%-20%的血清。