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如何和测风疹病毒滴度?

更新时间2018-03-16 18:32:48

实验室现在有vero细胞,风疹病毒感染vero细胞出现CPE现象不明显。

如何对风疹病毒进行滴度测定?

风疹临床是有特点的:

风疹从接触感染到症状出现,要经过14~21天。

病初1~2天症状很轻,可有低热或中度发热,轻微咳嗽、乏力、胃口不好、咽痛和眼发红等轻度上呼吸道症状。病人口腔粘膜光滑,无充血及粘膜斑,耳后、枕部淋巴结肿大,伴轻度压痛。通常于发热1~2天后出现皮疹,皮疹先从面颈部开始,在24小时蔓延到全身。皮疹初为稀疏的红色斑丘疹,以后面部及四肢皮疹可以融合,类似麻疹

。出疹第二天开始,面部及四肢皮疹可变成针尖样红点,如猩红热样皮疹。 皮疹一般在3天内迅速消退,留下较浅色素沉着。在出疹期体温不再上升,病儿常无疾病感觉,饮食嬉戏如常。

风疹与麻疹不同,风疹全身症状轻,无麻疹粘膜斑,伴有耳后、颈部淋巴结肿大。

 风疹是病毒性传染病,临床特点是:全身症状轻微,皮肤红色斑丘疹及枕后、耳后、颈后淋巴结肿大伴触痛,合并症少见。

病毒可通过胎盘传给胎儿而致各种先天缺陷,称为先天性风疹综合征。


(1)样品采集,作过筛试验仅需采集单份血样,但若需判断病毒感染者的免疫状态,需对可疑风疹患者在出现斑疹后3天内以及随后的14~21天分别取样同时检测。

(2)同一般ELISA,在对照和样品各孔中加PBS 50μl,继加样品10μl,25℃保温45min,洗涤、吸干。

(3)各孔加酶标记物250μl,同法保温和洗涤。

(4)再加pNPP底物溶液250μl,同法保温和洗涤后,加1mol/L氢氧化钠50μl中止反应,测定各孔吸光度值405nm,判断被测样品结果。

(5)若为阳性结果,可将样品作进一步稀释后作抗体滴度测定,比较先后两份样品结果,并进行判断:

 1.风疹病毒的IgG和lgM抗体均为阳性,或者是IgG抗体滴度≥1:512,表明有风疹病毒近期感染。

2.风疹病毒的IgG和IgM抗体均为阴性,表明没有受过风疹病毒感染。

3.风疹病毒的lgG抗体滴度<1:512,lgM抗体为阴性,说明有过既往感染史。

4.此外,再次感染风疹病毒,由于只出现短暂的IgM抗体或出现的水平很低,所以不易查出。

因此风疹病毒IgG抗体滴度在双份血清中有4倍以上升高,那么无论lgM抗体是否为阳性,都是风疹病毒近期感染的指标。 [英文缩写]RV—Ab,这项化验是判断是否感染风疹病毒的一项参考指标。[参考值]阴性或lgGAb<1:512。

风疹病毒的实验室检测是通过抽取静脉血检测体内抗风疹病毒的lgG和IgM抗体。[临床意义]风疹又称德国麻疹,发病高峰为春季至初夏。

风疹病毒抗体的阳性率随年龄增大而上升,新生儿可以通过早年感染了风疹病毒的母亲而获得风疹病毒的IgG抗体。lgM抗体于发疹4天左右产生,约10天达高峰,持续6—12周,偶尔也可持续达一年;IgG抗体较lgM抗体出现稍晚,逐渐上升,1—2个月达高峰,以后下降,多维持终生,人群中80%以上的人此抗体阳性。

 正常范围: 抗风疹病毒抗体IgM阴性,抗风疹病毒抗体IgG阳性。

检查介绍: 抗风疹病毒抗体IgM主要用于诊断风疹病毒的急性感染,一般在感染后2周血清出现抗风疹病毒抗体Ig。

临床意义: 阳性:风疹病毒感染。

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